大腸菌群檢測方法主要有濾膜法、多管發(fā)酵法、酶底物法、快速檢測試紙法和分子生物學(xué)檢測法。檢測時需根據(jù)樣本類型、檢測目的及設(shè)備條件選擇合適方法。
濾膜法通過特定孔徑濾膜截留細(xì)菌,將濾膜置于選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后計數(shù)典型菌落,適用于水質(zhì)等低濁度樣本檢測。多管發(fā)酵法利用乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸產(chǎn)氣特性進(jìn)行初發(fā)酵、復(fù)發(fā)酵確認(rèn),操作繁瑣但結(jié)果可靠,廣泛用于食品和環(huán)境樣本。酶底物法通過檢測β-半乳糖苷酶活性快速判斷,4-24小時可出結(jié)果,適合批量篩查??焖贆z測試紙法基于抗原抗體反應(yīng),10-15分鐘讀取結(jié)果,適合現(xiàn)場應(yīng)急檢測但靈敏度較低。分子生物學(xué)檢測采用PCR技術(shù)特異性擴(kuò)增目標(biāo)基因,精確度高但需要專業(yè)設(shè)備,多用于科研和溯源分析。
日常檢測中建議優(yōu)先選擇國家標(biāo)準(zhǔn)方法如濾膜法或多管發(fā)酵法確保結(jié)果準(zhǔn)確性,應(yīng)急場景可配合快速試紙法初步篩查。檢測前需規(guī)范采樣避免污染,實(shí)驗(yàn)室操作應(yīng)嚴(yán)格滅菌,不同樣本需調(diào)整預(yù)處理方式如食品需均質(zhì)處理,水樣需根據(jù)濁度選擇過濾或直接接種。定期進(jìn)行方法驗(yàn)證和質(zhì)控樣檢測,異常結(jié)果需用兩種方法復(fù)核,檢測報告應(yīng)注明方法依據(jù)和局限性。醫(yī)療機(jī)構(gòu)和食品企業(yè)應(yīng)建立標(biāo)準(zhǔn)化檢測流程,人員需持證上崗并定期參加能力驗(yàn)證。
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