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基因測序是什么原理?

病情描述:
測取基因的順序用的是基因測序,它的原理是什么?
共2個回答
夏廷毅 主任醫(yī)師 去掛號
清華大學第一附屬醫(yī)院 三級 放療科
DNA測序的方法有很多種,目前最常見的是雙脫氧終止法了。在測序用的緩沖液中含有四種dNTP及聚合酶,測序時分成四個反應(yīng),每個反應(yīng)除上述成分外分別加入2,3-雙脫氧的A、C、G,T核苷三磷酸(稱為ddATP,ddCTP,ddGTP,ddTTP),然后進行聚合反應(yīng)。在第一個反應(yīng)物中,ddATP會隨機地代替dATP參加反應(yīng)一旦ddATP加入了新合成的DNA鏈,由于其3位的羥基變成了氫,所以不能繼續(xù)延伸。所以第一個反應(yīng)中所產(chǎn)生的DNA鏈都是到A就終止了。同理第二個反應(yīng)產(chǎn)生的都是以C結(jié)尾的,第三個反應(yīng)的都以G結(jié)尾,第四個反應(yīng)的都以T結(jié)尾, 電泳后就可以讀出序列了。
張鞾 副主任醫(yī)師 去掛號
江蘇省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 三甲 腫瘤科
這個測序法,加了四種材料進去,ddT、ddA、ddG、ddC,能和原始的DNA序列配對,但因特殊的結(jié)構(gòu),導致復制終止。測定過程中,將待測樣品分為4份,每份中加入一樣改變后的材料。結(jié)束后,第一份中所有片段全是以ddT為終端的不同長度的序列,以此類推形成了長度不同,可以分辨出長短不同的序列,然后在看看這個序列對應(yīng)的添加的材料是哪一種,就能按照序列的長短來確定相應(yīng)的脫氧核苷酸了。
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