DNA濃度低可能由樣本采集不當(dāng)、保存條件不佳、提取方法錯(cuò)誤、樣本降解或疾病因素導(dǎo)致。主要有樣本采集量不足、保存溫度過高、提取試劑失效、核酸酶污染、遺傳代謝病等原因。
1、樣本采集量不足
采集血液、唾液或組織樣本時(shí)，若取樣體積過小或細(xì)胞數(shù)量不足，會(huì)導(dǎo)致DNA總量偏低。建議使用標(biāo)準(zhǔn)化采樣工具，確保樣本量達(dá)到檢測(cè)要求。對(duì)于血液樣本，成人外周血采集量通常需要3-5毫升。
2、保存溫度過高
DNA在常溫下易降解，樣本若未及時(shí)置于2-8℃冷藏或-20℃以下冷凍保存，核酸鏈會(huì)發(fā)生斷裂。運(yùn)輸過程中需使用干冰或低溫轉(zhuǎn)運(yùn)箱，避免反復(fù)凍融循環(huán)破壞DNA完整性。
3、提取試劑失效
過期的DNA提取試劑盒或配制不當(dāng)?shù)牧呀庖簳?huì)降低提取效率。需檢查試劑有效期，按照說明書比例配制溶液。苯酚-氯仿法等傳統(tǒng)提取方式更易受試劑純度影響，建議改用硅膠膜吸附柱提取法。
4、核酸酶污染
實(shí)驗(yàn)環(huán)境中存在的DNase會(huì)分解DNA分子。操作臺(tái)面需用核酸酶清除劑處理，移液器吸頭應(yīng)選擇無酶型。提取過程中添加EDTA等核酸酶抑制劑可有效保護(hù)DNA免受降解。
5、遺傳代謝病
某些遺傳性疾病如線粒體DNA耗竭綜合征會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)DNA合成障礙。這類患者的外周血白細(xì)胞DNA濃度常低于50ng/μL，需通過基因檢測(cè)確診。骨髓增生異常綜合征等血液病也會(huì)影響DNA產(chǎn)量。
日常檢測(cè)中應(yīng)規(guī)范采樣流程，使用無菌無酶耗材，樣本采集后立即低溫保存。實(shí)驗(yàn)室需定期校準(zhǔn)分光光度計(jì)，采用熒光定量法提高低濃度DNA檢測(cè)靈敏度。對(duì)于臨床疑似遺傳病患者，建議進(jìn)行全外顯子測(cè)序輔助診斷，必要時(shí)重復(fù)采樣檢測(cè)。飲食中補(bǔ)充葉酸、維生素B12等核苷酸合成原料，可能有助于改善某些代謝異常導(dǎo)致的DNA合成不足。
溫馨提示：醫(yī)療科普知識(shí)僅供參考，不作診斷依據(jù)；無行醫(yī)資格切勿自行操作，若有不適請(qǐng)到醫(yī)院就診
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