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食品大腸桿菌的檢測方法

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問題描述

食品大腸桿菌的檢測方法

醫(yī)生回答

于淑霞

于淑霞 副主任醫(yī)師

山東省立醫(yī)院

食品大腸桿菌檢測方法主要有增菌培養(yǎng)法、平板分離法、生化鑒定法、免疫學(xué)檢測法和分子生物學(xué)檢測法。食品大腸桿菌超標(biāo)可能引發(fā)胃腸炎、尿路感染等疾病,需通過專業(yè)檢測保障食品安全。

1、增菌培養(yǎng)法

將食品樣本置于乳糖膽鹽發(fā)酵管等選擇性培養(yǎng)基中,利用大腸桿菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的特性進(jìn)行初步篩選。該方法適用于低菌量樣本的富集,檢測周期需18-24小時,是國標(biāo)GB 4789.3規(guī)定的基礎(chǔ)檢測步驟。常見培養(yǎng)基包括EC肉湯、LST肉湯等。

2、平板分離法

采用伊紅美藍(lán)瓊脂或麥康凱瓊脂等顯色培養(yǎng)基,通過菌落形態(tài)和顏色特征進(jìn)行分離鑒定。典型大腸桿菌在EMB平板上呈現(xiàn)金屬光澤的紫黑色菌落,在MAC平板上形成紅色菌落。該方法需配合革蘭氏染色鏡檢確認(rèn),檢測靈敏度可達(dá)1CFU/g。

3、生化鑒定法

通過IMViC試驗(yàn)檢測吲哚產(chǎn)生、甲基紅反應(yīng)、VP反應(yīng)和檸檬酸鹽利用等生化特性。典型大腸桿菌表現(xiàn)為++--的生化模式,可與其他腸桿菌科細(xì)菌區(qū)分。商品化鑒定系統(tǒng)如API 20E可同時完成16項(xiàng)生化試驗(yàn),準(zhǔn)確率超過95%。

4、免疫學(xué)檢測法

采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測大腸桿菌特異性抗原,如O157:H7型菌株的志賀毒素。該方法檢測限可達(dá)10^3-10^4CFU/mL,適用于批量樣本快速篩查。膠體金免疫層析試紙條可在15分鐘內(nèi)完成現(xiàn)場檢測,但可能存在交叉反應(yīng)。

5、分子生物學(xué)檢測法

通過PCR技術(shù)擴(kuò)增uidA、lamB等靶基因,實(shí)時熒光PCR可實(shí)現(xiàn)4小時內(nèi)定量檢測。基因芯片技術(shù)可同步檢測多種致病型大腸桿菌,檢測限達(dá)1-10CFU/mL。全基因組測序適用于暴發(fā)溯源,但成本較高需專業(yè)設(shè)備支持。

日常需加強(qiáng)食品加工環(huán)節(jié)的衛(wèi)生管理,生熟食品分開處理,肉類充分加熱至中心溫度70℃以上。餐飲從業(yè)人員應(yīng)定期體檢,出現(xiàn)腹瀉癥狀立即調(diào)離崗位。家庭廚房注意砧板刀具消毒,剩菜冷藏不超過24小時。發(fā)現(xiàn)食品污染問題應(yīng)及時封存樣本,聯(lián)系市場監(jiān)管部門進(jìn)行專業(yè)檢測。

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